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牛乳头瘤病毒2型L1基因的克隆及原核表达
  • ISSN号:1008-0589
  • 期刊名称:《中国预防兽医学报》
  • 时间:0
  • 分类:S852.65[农业科学—基础兽医学;农业科学—兽医学;农业科学—畜牧兽医]
  • 作者机构:[1]石河子大学动物科技学院,新疆石河子832003, [2]中国农业科学院兰州兽医研究所,甘肃兰州730046
  • 相关基金:兵团国际科技合作项目(2012BC006);农业公益行业专项子课题(201303037-5)
中文摘要:

为表达牛乳头瘤病毒2型(BPV2)衣壳蛋白L1基N,本研究采用PCR方法从奶牛皮肤肿瘤病料样品中扩增BPV2沙湾分离株L1基因,克隆至pMDl8-T载体中,测序后进行分析。将BPV2沙湾株Ll基因亚克隆于原核表达质粒pGEX4T.1中,经IPTG诱导L1蛋白表达,并对重组蛋白进行SDS.PAGE和western blot分析。SDS.PAGE分析显示,诱导后能够表达分子量80l(u的重组蛋白;western blot显示该蛋白可以与抗BPV2多克隆抗体发生反应。小鼠免疫试验表明,BPV2L1重组蛋白可以诱导小鼠产生抗BPV2L1特异性抗体;琼脂扩散试验显示,重组L1蛋白具有良好的免疫原性。本研究原核表达BPV2L1蛋白,并证明其具有良好的反应原性及免疫原性,为牛乳头瘤病的疫苗和诊断试剂研发奠定了基础。

英文摘要:

For expressing L1 gene of bovine papillomavirus type 2 (BPV2), the BPV2 L1 gene was amplified from the skin lesions of affected cow by PCR and cloned into pGEX4T-1 vector for expressing in E.coli. The SDS-PAGE analysis revealed that the expressed recombinant L1 protein was 80 ku, which was recognized by anti-BPV2 polyclonal antibody detected by western blot. Immunologic tests showed that the recombinant L1 protein was able to induce specific antibodies agaist BPV2 in mice. Agar diffusion test demonstrated that the recombinant L1 protein could be used as antigen of diagnostic reagent for detections of BPV2 in infected cattle.

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期刊信息
  • 《中国预防兽医学报》
  • 北大核心期刊(2011版)
  • 主管单位:中国农业部
  • 主办单位:中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
  • 主编:步志高
  • 地址:哈尔滨市香坊区哈平路678号
  • 邮编:150001
  • 邮箱:zgyfsyxbhvri@163.com
  • 电话:0451-51051811 51051812
  • 国际标准刊号:ISSN:1008-0589
  • 国内统一刊号:ISSN:23-1417/S
  • 邮发代号:14-70
  • 获奖情况:
  • 全国农业优秀期刊奖
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,波兰哥白尼索引,英国动物学记录,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版)
  • 被引量:12844