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线性与分枝状聚乙烯亚胺介导基因体外转染的比较与研究
  • ISSN号:0438-0479
  • 期刊名称:《厦门大学学报:自然科学版》
  • 时间:0
  • 分类:Q786[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:[1]厦门大学生命科学学院,福建厦门361005
  • 相关基金:国家基础科学人才培养基金项目(J0630649),国家自然科学基金(30670408,30572077),福建省自然科学基金(2008J0108)资助
中文摘要:

聚乙烯亚胺(PEI)是一类新兴的阳离子多聚物非病毒载体,可缩聚DNA分子形成颗粒并转入真核细胞进行表达.本文选用分子量750ku分枝状PEI与分子量25ku线性PEI转染增强型绿色荧光蛋白(EGFP)报告基因于HeLa细胞,并对这两种PEI的转染效率进行比较.利用MTT法检测比较线性PEI与分枝状PEI的细胞毒性.通过凝胶阻滞实验比较两种PEI结合DNA能力.最后利用肝素介导释放实验比较两者在形成PEI/DNA复合物后释放DNA的能力.研究结果表明:线性PEI转染效率优于分枝状PEI,且随PEI/DNA质量比的增加而升高,而分枝状PEI则相反;两种PEI细胞毒性在一定范围内相近;分枝状PEI结合DNA能力略强于线性PEI;但是分枝状PEI释放DNA的能力远小于线性PEI这可能导致DNA在细胞内无法从PEI/DNA复合体上释放出来,从而影响转录的正常进行,最终导致分枝状PEI转染效率下降.

英文摘要:

Polyethylenimine is a widely-used non-viral vector with polycation. It can condense DNA to form PEI/DNA complexes, which can be transfected into mammalian cells for gene expression. In this study, enhanced green fluorescence protein was transfected into HeLa ceUs by linear PEI and branched PEI, then compared the cytotoxic effects by the method of MTT assay. The ability of DNA binding of both linear PEI and branched PEI was identified, and the level of DNA release from PEI/DNA complexes was compared. The results showed that the transfection efficiency of linear PEI was much better than that of branched PEI. Linear PEI transfection efficiency increased with increasing PEI/DNA ratio, while branched PEI was contrary. Both PEI have the same cytotoxic effects in selected range and they have almost the same ability of DNA binding. In addition, DNA is much more difficult to release from branched-PEI/DNA complexes than from linear-PEI/DNA complexes, which may be the reason of the poor transcription leading to decreasing transfection efficiency of branched PEI.

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期刊信息
  • 《厦门大学学报:自然科学版》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:中华人民共和国教育部
  • 主办单位:厦门大学
  • 主编:谢素原
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  • 国际标准刊号:ISSN:0438-0479
  • 国内统一刊号:ISSN:35-1070/N
  • 邮发代号:34-8
  • 获奖情况:
  • 多次被评为全国、华东地区、福建省的优秀科技期刊,2001年入选国家新闻出版总署评定的"中国期刊方阵",2003年获国家新闻出版总署颁发的"第二届国家科技...,2006年获国家教育部科技司颁发的"首届中国高校精...
  • 国内外数据库收录:
  • 俄罗斯文摘杂志,美国化学文摘(网络版),美国数学评论(网络版),德国数学文摘,美国剑桥科学文摘,美国生物科学数据库,英国科学文摘数据库,英国动物学记录,日本日本科学技术振兴机构数据库,中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2004版),中国北大核心期刊(2008版),中国北大核心期刊(2011版),中国北大核心期刊(2014版),英国英国皇家化学学会文摘,中国北大核心期刊(2000版)
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