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荧光素酶基因luc在大肠杆菌中表达条件优化
  • ISSN号:2095-1736
  • 期刊名称:《生物学杂志》
  • 时间:0
  • 分类:Q768[生物学—分子生物学]
  • 作者机构:[1]江南大学工业生物技术教育部重点实验室江南大学工业微生物研究中心,江苏无锡214122
  • 相关基金:国家自然科学基金(20676053);国家863高科技研究发展计划(2006AA020103);江苏省青年科技创新人才基金(BK2006504);长江学者和创新团队发展计划资助(IRT0532)
中文摘要:

对重组荧光素酶大肠杆菌菌株M15/pQE30-luc进行了表达条件的优化研究。单因素结果表明:在初始pH值7.0,装液量为20%,2%的接种量,终浓度为0.5mmol/L的IPTG,添加10—30mmol/L的Mg^2+,摇床转速为200r/min,37℃诱导3.5h酶的表达量最高。正交试验结果表明:初始pH值为7.0,添加40mmol/LMg^2=,接种量2%,装液量为20%时表达量最高,比酶活达1.63×10^8RFU/mg蛋白。

英文摘要:

The luc gene was subcloned into expression vector pQE30 and its product LUC was overexpressed in Escherichia coli M15. The optimum fermentation condition was: pH 7.0, the amount of medium 20% , inoculum size 2%, the final concentration of IPTG 0.5 mmoL/L, 10 - 30 mmol/L Mg^2 + , the rotating speed 200 r/min, inducing 3.5h at 37℃. After orthogonal experimental design, the result showed that the initial pH7.0, 40mmol/L Mg^2+ , 2% inoculation amount and the 20% medium amount had the best expression of LUC, and the specific activity was 1.63 × 10^8 RFU/mg protein.

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期刊信息
  • 《生物学杂志》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:安徽省科学技术协会
  • 主办单位:合肥市科学技术协会
  • 主编:蔡敬民
  • 地址:安徽省合肥市花园街83号合肥大厦9楼
  • 邮编:230001
  • 邮箱:swxzz@163.com
  • 电话:0551-2673629
  • 国际标准刊号:ISSN:2095-1736
  • 国内统一刊号:ISSN:34-1081/Q
  • 邮发代号:26-50
  • 获奖情况:
  • 荣获第四届华东地区优秀期刊,荣获安徽省优秀科技期刊学术类二等奖
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),英国农业与生物科学研究中心文摘,美国剑桥科学文摘,英国动物学记录,中国中国科技核心期刊
  • 被引量:11484