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沉默DEPDC1基因表达对鼻咽癌细胞系HNE-1生长和细胞周期的影响
  • ISSN号:1674-7666
  • 期刊名称:《中国细胞生物学学报》
  • 时间:0
  • 分类:Q253[生物学—细胞生物学]
  • 作者机构:[1]重庆医科大学附属第一医院耳鼻咽喉科,重庆400016, [2]重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心,重庆400016
  • 相关基金:国家临床重点专科建设项目经费基金卫办医政[2012]649号和重庆市卫生局重点项目(批准号:2013-1-004)资助的课题
中文摘要:

为探讨沉默DEPDC,基因表达对鼻咽癌细胞系HNE.1生长和细胞周期的影响,该实验设计合成靶向DEPDCl的小分子干扰RNA(smallinterferingRNA,siRNA)转染人鼻咽癌HNE-1细胞。转染后,采用荧光定量PCR、免疫印迹、MTT及流式细胞术方法检测细胞内DEPDCl的表达量以及细胞周期、生长增殖、凋亡的变化及其可能机制。结果显示,转染DEPDClsiRNA后,DEPDC1基因在mRNA及蛋白水平的表达量明显降低;大量细胞被阻滞于G2/M期,生长增殖减慢,凋亡增加。荧光定量PCR结果表明,抑制NF—KB激活的A20基因表达量明显上调,受NF-κB调控的肿瘤相关靶基因的表达量下降,包括C-MYC、MMP9、ICAM-1、BCL-2基因。由此说日月,沉默DEPDC1基因可以影响HNE-1细胞的周期,抑制其生长增殖,促进凋亡,其机制可能与抑制NF-κB通路有关。

英文摘要:

To investigate the potential role of DEPDC1 in nasopharyngeal carcinoma, the specific siRNAs against DEPDC1 was designed, synthesized and transiently transfected into the nasopharyngeal carcinoma cell line HNE-1. The results of RT-PCR and Western blot clearly demonstrated that the expression of DEPDC1 was efficiently inhibited at both mRNA and protein levels. FACS (fluorescence activated cell sorter), MTT and apoptosis assays demonstrated that DEPDC1 depletion resulted into the GE/M arrest, growth retardation and apoptosis. In addition, results of RT-PCR showed that DEPDC1 depletion caused the upregulation of A20 gene, an inhibitor of NF-κB activation, and the downregulation of several NF-κB target genes such as C-MYC, MMPg, ICAM-1 and BCL-2. Taken together, our results suggested that siRNA-mediated DEPDC1 depletion caused cell cycle arrest, led to growth inhibition induced apoptosis in the nasopharyngeal carcinoma cell line HNE-1, which were possibly mediated by the inactivation of NF-κB pathway.

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期刊信息
  • 《中国细胞生物学学报》
  • 中国科技核心期刊
  • 主管单位:
  • 主办单位:中国细胞生物学学会 中国科学院上海生命科学研究院 生物化学与细胞生物学研究所
  • 主编:郭礼和
  • 地址:上海岳阳路319号31A楼303室
  • 邮编:200031
  • 邮箱:CJCB@SIBS.AC.CN
  • 电话:021-54920950 54922892
  • 国际标准刊号:ISSN:1674-7666
  • 国内统一刊号:ISSN:31-2035/Q
  • 邮发代号:4-296
  • 获奖情况:
  • 国内外数据库收录:
  • 美国化学文摘(网络版),中国中国科技核心期刊,中国北大核心期刊(2011版)
  • 被引量:2456